叙利亚沙漠中，女吸血鬼丹尼卡（ParkerPosey饰）带领一队同类，深入古老的沙漠宫殿，意欲唤醒沉睡的吸血鬼之王——德雷克（DominicPurcell饰）。夜色中，刀锋（韦斯利•斯奈普斯WesleySnipes饰）仍然与吸血鬼们进行着无休止的战斗，但他很快落入了丹尼卡的圈套，误杀了一名人类，因此被FBI探员威尔逊等人抓捕。与此同时，刀锋的老搭档惠斯勒之女阿比盖尔（JessicaBiel饰）同汉尼拔金（RyanReynolds饰）等年轻人秉持与刀锋相近的信念，组成了一支以自身为诱饵来消灭吸血鬼的队伍，他们将刀锋从FBI和丹尼卡手中救出，但后者对他们的胆大妄为嗤之以鼻，然而面对强大的吸血鬼王德雷克，他们不得不并肩作战……

　　自从阿伯拉罕（KrisKristofferson饰）被吸血鬼带走，日行者刀锋（韦斯利•斯奈普斯WesleySnipes饰）就没有停止寻找这位父亲一样的老搭档，并终于在东欧将其救出。阿伯拉罕缺席的日子里，刀锋依靠新伙伴斯加德担任后勤支持。
　　不久吸血鬼长老派人传递停战协议，只因吸血鬼中出现了新的变种——收割者，收割者同时以人类和吸血鬼为食，而且由于过快的新陈代谢导致他们需求惊人。刀锋为保全人类同意带领由长老之女内纱（LeonorVarela饰）、雪人（甄子丹饰）等组成的吸血鬼血帮部队，消灭收割者，但岂料这一切是吸血鬼的阴谋……

　　林肯（伊万•麦克格雷格EwanMcGregor饰）和乔丹（斯嘉丽•约翰逊ScarlettJohansson饰）以为他们生活在一个与世隔绝的社区里。据科学家说，他们是地球最后一批存活的人类。而在他们这个群体里面，将会抽签决定人选，派去一个世外桃源的小岛上面生活。然而在没选中之前，他们得忍受没有自由、备受监管的生活。
　　当林肯和乔丹“幸运”当选后，他们却发现了一个惊人的秘密——原来所谓的世外桃源岛根本不存在，而他们本身，也只是岛上居民克隆版本；他们前往小岛，迎接来的不是美丽生活，而是掏出他们的鲜活的器官，用以拯救人类。而林肯亲眼目睹了他的朋友，如何在手术刀下被解剖。
　　于是，林肯毅然决定和女友乔丹，踏上逃亡之路……